ОЦІНКА ЧАСТИКИ ФІЗІОЛОГІЧНО АКТИВНИХ КЛІТИН У НАКОПИЧУВАЛЬНИХ КУЛЬТУРАХ PHAEODACTYLUM TRICORNUTUM ТА NITZSCHIA SP. ЗА ДОПОМОГОЮ ПРОТОЧНОЇ ЦИТОМЕТРІЇ
Ключові слова:
життєздатність мікроводоростей, проточна цитометрія, діацетат флуоресцеїну, ферментативна активність, фермент естеразаАнотація
Вивчення співвідношення фізіологічно активних (живих) і неактивних (мертвих) кліток в моновидових накопичувальних культурах морських діатомових водоростей Phaeodactylum tricornutum та Nitzschia sp. за допомогою проточної цитометрії показало, що у міру старіння культур знижувалися внутріклітинний вміст хлорофілу і ферментативна активність, збільшувалася кількість мертвих кліток. Вихід культур у стаціонарну фазу спостерігали через 4 доби – у Nitzschia sp. і 15 діб – у P. tricornutum. У експоненціальній фазі зростання частка мертвих кліток не перевищувала 10% в обох культурах, тоді як в стаціонарній фазі вона зростала майже до 100 % в Nitzschia sp. і 70 % – в P. tricornutum. Апробований метод може застосовуватися для визначення долі живих клітин у природних популяціях обох досліджених видів.
Посилання
Луста К. А, Фихте Б. А. Методы определения жизнеспособности микроорганизмов. – Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1990. – 186 с.
Одум Ю. Экология. – М.: Мир, 1975. – 741 с.
Парсонс Т. Р., Такахаши М., Харгрейв Б. Биологическая океанография. – М.: Легкая промышленность, 1982. – 432 с
Agustí S, Sánchez MC. Cell viability in natural phytoplankton communities quantified by a membrane permeability probe. // Limnol Oceanogr. – 2002. –47. – P. 818 – 828.
Bentley-Mowat J. A. Application of fluorescence microscopy to pollution studies on marine phytoplankton. // Bot. Mar. – 1982. – 28. – P. 203 – 204.
Brookes J. D., Geary S. M., Ganf G. G., Burch M. D. Use of FDA and flow cytometry to assess metabolic activity as an indicator of nutrient status in phytoplankton. // Mar. Freshw. Res. – 2000. – 51. –P. 817 – 823.
Davey H. M., Kell D. B. Flow cytometry and cell sorting of heterogeneous microbial populations: the importance of single-cell analyses. // Mic. Rev. – 1996. – 60, No. 4. – P. 641 – 696.
Dorsey J., Yentsch C. M., Mayo S., McKenna C. Rapid analytical technique for the assessment of cell activity in marine microalgae. // Cytometry. – 1989. – 10. – P. 622 – 628.
Georgieva D. M., Kruleva M. M. Cytochemical investigation of long-term stored maize pollen. // Euphytica. – 1994. – 72. – P. 87 – 94.
Gilbert F, Galgani F, Cadiou Y. Rapid assessment of metabolic activity in marine microalgae: application in ectotoxicological tests and evaluation of water quality. // Mar Biol. – 1992. – 112. P. 199 – 205.
Guillard R.R.L. Culture of phytoplankton for feeding marine invertebrates in “Culture of Marine Invertebrate Animals.” – USA: Plenum Press, 1975. – P. 26 – 60.
Guillard R.R.L., J.H. Ryther. Studies of marine planktonic diatoms. I. Cyclotella nana and Detonula confervacea // Can. J. Microbiol. – 1962. – 8. – P. 229 – 239.
Helson – Harrison J., Helson – Harrison Y., Shivanna K. R. The evaluation of pollen quality, and a further appraisal of the fluorochromatic (FCR) test procedure. // Theor. Appl. Genet. –1984. – 67. – P. 367 – 375.
Jochem F. Dark survival strategies in marine phytoplankton assessed by cytometric measurement of metabolic activity with fluorescin diacetate. // Mar Biol. – 1999. – 135. – P. 721 – 728.
Jones R. P. Measures of yeast and deactivation and their meaning. – Process Biochemistry, 1987. – P. 117 – 128.
Garvey M., Moriceau В., Passow U. Applicability of the FDA assay to determine the viability of marine phytoplankton under different environmental conditions. // Mar Ecol Prog Ser. – 2007. – 352. – P. 17 – 26.
Masashi O., Tomoo S., Yoshio E. An evaluation of viable staining dyes suitable for marine phytoplankton. // Cytometry – 2000. – 51, No. 3. – P. 153 –157.
Onji M., Sawabe T., Ezura Y. An evaluation of viable staining dyes suitable for marine phytoplankton. // Bull Fac Fish Hokkaido Univ. – 2000. – 51. – P.151 –158.
Veldhuis M. J. W, Kraay G. W., Timmermans K. R. Cell death in phytoplankton: correlation between changes in permeability, photosynthetic activity, pigmentation and growth. // J. Phycol. – 2001. – 36. – P. 167 – 177.
Yentsch C. M. Flow Cytometry: Near real-time information about Ocean Biology. // Oceanography. –1990. – 3, No. 2. – P. 47 – 50.
